内切酶和外切酶的区别
内切酶和外切酶的区别是水解位置不同。核酸内切酶是一类能从DNA分子中间水解磷酸二酯键,从而切断双链DNA的核酸水解酶。核酸外切酶是一类能从多核苷酸链抄的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键,降解核苷酸的酶。切点要求不同核酸内切酶的切点大多很严格,要求专一的核苷酸顺序,即识别顺序。而核酸外切酶的切点要求比较低。
限制性核酸内切酶从各种细菌和古生菌中获得,每一种都对多核苷酸链中的不同位点具有特异性。
切割的序列形成单链末端,也称为粘性末端,然后通过 DNA 连接酶进行杂交。产生的 DNA 称为重组 DNA,该过程称为重组。
限制性核酸内切酶是最重要的核酸内切酶组之一,根据其作用机制分为三类。
I 型核酸内切酶是在大约 1000 个碱基对的随机位点切割的大型多亚基复合物。II 型核酸内切酶是在没有 ATP 的情况下切割序列的较小亚基。III 型核酸内切酶也很复杂,可切割 25 个碱基对的序列。
核酸内切酶可以切割双链 DNA、单链 DNA 甚至 RNA。
这些酶对于 DNA 修复至关重要,因为它们可以精确地识别和切割受损的 DNA。
这可以防止不必要的切割和其他酶可能发生的进一步损害。
限制性核酸内切酶在其作用之前可能会经历一段滞后期。这种滞后期可能是由于识别特定站点所需的时间。
因为核酸内切酶会在中间切割 DNA 片段,所以会产生寡核苷酸。
一些核酸内切酶具有防御功能,可以防止某些病原体进入。
单链的核酸外切酶包括大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ(exoⅠ)和核酸外切酶Ⅶ(exoⅦ)。核酸外切酶Ⅶ(exoⅦ)能够从5′-末端或3′-末端呈单链状态的DNA分子上降解DNA,产生出寡核苷酸短片段,而且是唯一不需要Mg2+离子的活性酶,是一种耐受性很强的核酸酶。核酸外切酶Ⅶ(exoⅦ)可以用来测定基因组DNA中一些特殊的间隔序列和编码序列的位置。它只切割末端有单链突出的DNA分子, 实际操作时需要配合解旋酶操作。